目的 探討TGF-β3 基因修飾后退變髓核細胞生物學效應以及植入兔退變椎間盤后對退變椎間盤的影響。 方法 將重組腺病毒載體Ad-TGF-β3 與第2 代退變髓核細胞按10 ∶ 1 比例混合培養(yǎng)轉(zhuǎn)染（Ad-TGF-β3 組），待細胞融合后傳代，MTT 檢測轉(zhuǎn)染細胞增殖活性，Western blot 檢測TGF-β3 蛋白含量，免疫細胞化學染色觀察對數(shù)生長期轉(zhuǎn)染細胞Ⅱ型膠原染色陽性率；采用病毒空載體轉(zhuǎn)染髓核細胞（Adv 組）和未經(jīng)轉(zhuǎn)染髓核細胞（空白組）作為對照。取30 只新西蘭兔，體重3.2 ～ 3.5 kg，雌雄不限，通過針刺L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤制備椎間盤退變模型。將實驗動物按照隨機數(shù)字法分為3 組，轉(zhuǎn)染細胞組（A 組，n=12）、退變細胞組（B 組，n=12）和空白對照組（C 組，n=6）。A、B 組將100 μL 濃度為1 × 105 個/mL 對應細胞懸液注射入退變椎間盤，C 組同法注入等量PBS。注射后6、10、14 周取A、B 組各4 只、C 組2 只實驗動物處死，取L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤行組織學觀察，RT-PCR 檢測Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA 表達。 結(jié)果 Ad-TGF-β3轉(zhuǎn)染后髓核細胞活性明顯改善；轉(zhuǎn)染后3、7、14 d，TGF-β3在髓核細胞內(nèi)表達逐漸升高；Ad-TGF-β3 組髓核細胞細胞質(zhì)內(nèi)見棕黃色Ⅱ型膠原陽性染色，陽性率顯著高于Adv 組及空白組（P  lt; 0.05）。組織學觀察示，A 組椎間盤退變程度較B、C組明顯減輕。6、10、14 周A組Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA表達顯著高于B、C組，差異均有統(tǒng)計學意義（P  lt; 0.05）。 結(jié)論 TGF-β3 基因修飾退變髓核細胞后可明顯改善細胞生物活性，轉(zhuǎn)染后髓核細胞植入兔體內(nèi)可明顯增加退變椎間盤的基質(zhì)分泌。

引用本文： 宋希元,彭圣智. TGF-β3 修飾退變髓核細胞移植修復兔退變椎間盤的效果觀察. 中國修復重建外科雜志, 2012, 26(7): 790-795. doi: 復制