• (華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院 心血管外科, 武漢 430022);

目的 探討利用Toll樣受體關(guān)鍵蛋白轉(zhuǎn)錄水平抑制劑髓細(xì)胞樣分化標(biāo)記物(myeloid differentiation marker 88,MyD88) siRNA,制備半成熟樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)的表型和致耐受功能。 方法 取BALB/c小鼠骨髓接種、培養(yǎng),加入濃度為10ng/ml 的重組小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rmGM-CSF)誘導(dǎo),培養(yǎng)至第8d將DC分為3組,空白對照組:于培養(yǎng)過程中不加其它任何物質(zhì);LPS組:加入終濃度為1μg/ml 的LPS;實(shí)驗(yàn)組:加入MyD88 siRNA 4h后,再加入1μg/ml 的LPS。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測3組DC 的表型,用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測培養(yǎng)上清的白細(xì)胞介素10(IL-10)、白細(xì)胞介素12(IL-12)的含量,初次和再次混合淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測DC刺激T細(xì)胞增殖能力,并觀察術(shù)后鼠移植心存活時(shí)間。 結(jié)果 空白對照組DC表型為CD11c+、CD25-、CD40 low、CD80low、CD86low和MHC-Ⅱlow未成熟表型DC,再經(jīng)LPS刺激后成為成熟表型DC;而實(shí)驗(yàn)組DC表型為CD11c+、CD25-、CD40mid、CD80low、CD86low和MHC-Ⅱmid半成熟表型,其IL-10/IL-12比率明顯增高;可誘導(dǎo)同種異型T細(xì)胞無反應(yīng)性,并能延長移植心存活時(shí)間。 結(jié)論 MyD88siRNA轉(zhuǎn)染結(jié)合LPS刺激可使未成熟DC進(jìn)一步分化為一種半成熟DC,較未成熟DC擁有更穩(wěn)定有效的致耐受特性。

引用本文: 劉超,孫宗全,陳家軍等. 用MyD88 siRNA制備半成熟樹突狀細(xì)胞致免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2007, 14(4): 275-279. doi: 復(fù)制