MicroRNA-129 促进骨髓间充质干细胞向心肌分化的实验研究_《中国胸心血管外科临床杂志》

作者：

路喆鑫 , 连锋 , 薛松 , 朱洪生

上海交通大学医学院附属仁济医院　心血管外科，上海　200147;

关键词：

骨髓间充质干细胞　心肌分化　microRNA-129 　糖原合成酶激酶

DOI：

10.7507/1007-4848.20130176

视频：

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目的　研究microRNA-129 （mir-129）对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BM-MSCs）向心肌分化过程中的促进作用及其机制。方法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，通过慢病毒转染使细胞获得过表达基因分为4组：对照组（MSCs）；慢病毒空转组（Lentiviral vectors＋MSCs，Lv-MSCs）；mir-129单转染组（mir-129-MSCs）；mir-129＋糖原合成酶激酶（GSK-3β）双转染组（mir-129＋GSK-3β-MSCs）。以10 μmol/L浓度的5-氮杂胞苷（5-Aza）诱导MSCs向心肌细胞分化后，分别以第1 d、5 d、10 d、15 d和20 d为时间点，采用realtime-PCR检测 GATA-4、NKx2.5、MEF-2C的mRNA水平，以第10 d、15 d、20 d为时间点，用蛋白质印迹法（Westernblotting）检测肌钙蛋白I （cTnI）、结蛋白（Desmin）、GSK-3β以及磷酸化β-catenin与非磷酸化β-catenin的表达量。结果与对照组比较，随着研究时间点的推移，mir-129单转染组反映心肌分化的相关标记物基因和蛋白水平明显升高，GSK-3β的表达水平则显著降低，非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值升高；当MSCs同时过表达mir-129和GSK-3β时，相关的心肌标记物基因和蛋白均低于mir-129单转染组，非磷酸化β-catenin/磷酸化β-catenin比值明显降低。结论过表达mir-129能够促进MSCs向心肌细胞分化，可能的机制是通过抑制GSK-3β的生成，从而削弱了对β-catenin的磷酸化抑制，后者游离入核开启调控干细胞下游的心肌分化途径。

引用本文： 路喆鑫,连锋,薛松,朱洪生. MicroRNA-129 促进骨髓间充质干细胞向心肌分化的实验研究. 中国胸心血管外科临床杂志, 2013, 20(5): 570-576. doi: 10.7507/1007-4848.20130176 复制

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